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High Fidelity HS DNA聚合酶是一款具有优异高保真性能的聚合酶,该聚合酶添加了单克隆抗体,可用于热启动PCR实验。该产品具有3'-5'核酸外切酶活性,PCR扩增产物为平末端,对于动物、植物样本、高GC、长片段样本均有很好的扩增效率。该产品还可用于分子克隆、基因鉴定、PCR检测等实验。
High Fidelity HS 2X Master Mix是经过优化的包含聚合酶,dNTPs、MgCl2 、稳定剂等的预混液,只需加入模板、引物和水即可进行扩增。
l 产品组份
组份名称
规格 X 数量
200 T (50 µL 反应体系)
High Fidelity HS 2X Master Mix
1 mL x 5
l 保存温度
-20℃储存
l 推荐反应体系
反应体系(50 µL 反应体系)
组份
用量
最终浓度
DNA 模板
Variable
<300 ng
上游引物 (10 µM )
1 μL
0.2 µM
下游引物 (10 µM )
25 μL
1X
Nuclease-free H2O
To 50 μL
l 推荐反应程序
推荐的 qPCR 反应程序如下
步骤
温度
时间
循环数
预变性
98℃
45s
1
变性
10s
25-35
退火
55-65℃
20-30s
延伸
72℃
10-30 s/kb
终延伸
5-10 min
Hold
4-10℃
注:适当延长延伸反应时间,可提高扩增产量。对于高GC等复杂
模板可以适当延长预变性时间至 3min。
l 注意事项
推荐将所有的反应组分在冰上配制,然后快速将反 应体系转移到预热至98°C 的PCR仪中。
l 模版推荐使用量
基因组 DNA 10-200 ng
质粒 DNA 1pg-10 ng